2. 四川农业大学资源学院, 成都 611130
2. College of Resources, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China
我国土壤重金属污染问题突出,严重危及农作物安全生产[1]。土壤重金属污染或异常成因可分为人为和自然来源两大类[2-3],其中,后者主要表现为成土母质本身重金属含量高而导致土壤重金属富集[4-5]。我国地质高背景地区土壤重金属超标率高、成因复杂且面积广,主要分布于我国西南等地区[5-6]。不同地区土壤重金属的富集类型不同,包括残坡积型、运积型及次生富集型[7]。成土母质的岩性、河流冲积类型以及风化侵蚀程度会影响土壤重金属的分布特征[8-9]。
我国西南地区分布有大面积的玄武岩和碳酸盐岩,土壤重金属元素富集程度高,是典型的重金属元素地球化学高背景区[4,10-11]。例如,云南省土壤镉(Cd)背景值为0.155 mg·kg−1,调查发现,云南宣威热水镇碳酸盐岩分布区表层土壤Cd超标严重,潜在生态风险达“中度污染”以上的样品占10.9%[12];贵州赫章县、威宁县、长顺县和册亨县农田土壤Cd超标率分别达100%、100%、80%和50%[13]。地质高背景地区土壤重金属异常富集对农产品安全生产造成潜在危害,调查发现马铃薯[13]、水稻[14]等主栽作物均存在超标现象。总体而言,我国西南地质高背景区土壤重金属污染呈现“总量高、有效性低”的特征,存在农作物可食部分重金属超标现象;同时,地质高背景区土壤母质的不同也可能导致重金属的有效性和作物吸收性差异较大[14]。因此,我国西南地质高背景区的农作物安全生产风险应予重视。
伴矿景天(Sedum plumbizincicola)是一种Cd、锌(Zn)超积累植物[15],有关超积累植物是否能有效吸收、去除地质高背景土壤中的Cd,从而实现土壤Cd总量和有效态的降低以及农产品的安全生产,尚鲜有报道;超积累植物对地质高背景土壤上Cd的去除、修复能力与可行性尚待探讨。因此,本研究以云南石林、富源和罗平等三地Cd高背景农田土壤为对象,开展温室盆栽试验,探究Cd、Zn超积累植物伴矿景天对云南典型地质高背景土壤Cd的吸取修复潜力,进一步研究超积累植物吸取修复以及土壤水分调控对后茬水稻安全生产的影响,以期为地质高背景土壤中Cd总量和有效态的降低以及农产品安全生产提供理论依据和技术支撑。
1 材料与方法 1.1 供试土壤与植物供试土壤采自云南省昆明市石林县圭山镇海邑下海子村(24.64° N,103.55° E)、曲靖市富源县营上镇大坪村石板沟村(25.49° N,104.37° E)和曲靖市罗平县马街镇拖康素村(25.27° N,104.24° E)等地农田0~20 cm表层土壤,均为云南典型镉地质高背景土壤。其中,石林和罗平土壤母质均为石灰岩风化物,土壤质地分别为粉砂质黏土、黏土;富源土壤由玄武岩风化物发育,土壤质地为黏土,三地供试土壤部分化学性质如表 1。将采集的土壤去除杂物,自然风干,破碎、研磨,过10目尼龙筛,混匀后装盆。供试伴矿景天采自浙江省杭州市郊区的试验基地,供试水稻品种为甬优15,由浙江富阳农业和林业局提供。
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表 1 供试云南镉地质高背景土壤基本化学性质 Table 1 Selected chemical properties of the tested soils with a high cadmium geological background from Yunnan Province |
试验在中国科学院南京土壤研究所(简称“土壤所”)玻璃温室进行,选取采集的三地土壤,设置两种处理:(1)种植伴矿景天;(2)不种植伴矿景天(对照),每处理重复4次,共24盆,每盆装土1.5 kg(烘干基),种植3株伴矿景天。第一季吸取修复试验于2019年9月15日开始,生长90 d后(12月14日)收获植株地上部;第二年种植水稻(详见试验二);水稻收获后放置一年,于2021年10月10日种植第二季伴矿景天,2022年3月31日收获并留茬,继续种植第三季伴矿景天,6月15日收获。试验在伴矿景天移栽或留茬15 d后施肥,每次施用分析纯尿素和磷酸二氢钾各1.00 g;植物生长期间注意浇水以保持土壤水分在田间持水量的70%左右。
1.2.2 试验二:植物吸取修复对后茬水稻生长及镉吸收影响试验上述三地Cd地质高背景土壤,经伴矿景天吸取修复一季后,于土壤所温室开展水稻种植盆栽试验,同时设置“未经伴矿景天吸取修复”处理作为对照。水稻采用直播法,于2020年5月31日播种,出苗一周后定苗每盆2株,10月27日收获。期间,分别于6月8日、6月25日、7月2日、9月9日施用追肥,每次施用分析纯尿素和磷酸二氢钾各1.00 g;具体水分管理措施为:播种后保持水层厚度约为2 cm,出苗45 d后烤田3 d,其后继续保持约2 cm淹水层。
1.2.3 试验三:不同水分管理方式对镉高背景土壤上水稻生长和Cd吸收性影响试验鉴于试验二中所有处理种植的水稻糙米Cd含量未超标,设计了不同水分管理条件下的水稻种植试验,探究地质高背景土壤上种植水稻的安全风险,也进一步说明植物修复的必要性。本试验亦在土壤所玻璃温室进行,选取云南富源未进行植物吸取修复的Cd高背景土壤,设置三种水分管理方式:(1)淹水,保持盆栽水层距土表约2 cm;(2)干湿交替,先浇水至约2 cm水层,土壤水分蒸腾、蒸发至约土壤最大田间持水量(WHC)的60%左右再浇水至约2 cm水层,如此循环;(3)旱作,维持含水量在WHC的60%~80%。每处理重复4次,共12盆。每盆装土1.5 kg(烘干基)。水稻于2021年6月8日播种,出苗一周后定苗每盆2株,分别于6月26日、7月17日、8月4日、9月16日施肥,每次施用分析纯尿素和磷酸二氢钾各1.00 g。水稻烤田完成后,于7月14日开始实施不同水分管理方式,持续至10月19日收获。
1.2.4 样品采集与处理采集试验一的伴矿景天地上部样品,先用自来水洗净,再用去离子水冲洗2~3次,用吸水纸吸干表面水分,105 ℃杀青30 min、75 ℃下烘干至恒重,称取干物质质量,最后用不锈钢粉碎机磨碎。
采集试验二和试验三的水稻秸秆和稻穗。秸秆同上清洗烘干后,称重、不锈钢粉碎机磨碎。稻穗则晾干后脱粒,稻谷用小型砻谷机出糙,再用不锈钢粉碎机磨碎。
伴矿景天盆栽和水稻盆栽每盆土壤经充分混匀后,取鲜土约100 g,风干后过10目和100目筛,用于测定土壤Cd/Zn全量和提取态浓度以及化学形态。
1.3 样品测定土壤基本理化性质测定:参考《土壤农业化学分析方法》[16]。
土壤全量Cd/Zn测定:称量约0.200 0 g过100目尼龙筛的土壤样品于聚四氟乙烯(Polyfluoroalkoxy,PFA)消解罐中,加入5 mL HNO3(GR)和5 mL HCl(GR)在105 ℃下密封消解6 h,放置电热板上蒸至约1 mL定容,过滤,消解液重金属浓度利用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS,Nexion 2000,Perkin Elmer,美国)测定。为保证分析质量,每消解批次均包含土壤标准物质GSS-5进行质量控制,其Cd和Zn浓度测定值均在参考值的100%±10%范围内;同时,每消解批次还设置试剂空白,用以分析消解过程中可能存在的污染。
土壤CaCl2提取态Cd/Zn测定:称量2.50 g过10目尼龙筛的土壤样品于50 mL离心管内,加入25 mL 0.01 mol·L–1的CaCl2溶液,置于水平振荡器中,以180 r·min–1的频率振荡2 h,离心、过滤,提取液重金属浓度利用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS,Nexion 2000,Perkin Elmer,美国)测定。
植物样品全量Cd/Zn测定:采用8 mL 1︰3的优级纯H2O2-HNO3混合酸进行消解,利用电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-OES,Avio™ 200,Perkin Elmer,美国)或ICP-MS测定。
土壤Cd/Zn化学形态测定:采用BCR(European Community Bureau of Reference,欧洲共同体参比司)连续分级提取法,略作修改,详细步骤见表 2。
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表 2 BCR(欧洲共同体参比司)连续分级提取步骤 Table 2 The BCR(European Community Bureau of Reference)analytical procedure for different chemical fractions of soil heavy metals |
植物吸取修复效率/% =(地上部生物量(g·pot−1)×地上部重金属浓度(mg·kg−1))/(修复前土壤重金属浓度(mg·kg−1)×土壤质量(g·pot−1))×100。
所有数据使用Excel 2016和SPSS 16.0统计软件进行分析,采用单因素方差分析(ANOVA)对处理间的差异进行检验(P < 0.05),多重比较方法为最小显著性差异法(LSD)。
2 结果 2.1 镉地质高背景土壤上伴矿景天生物量及镉锌吸收伴矿景天生物量结果显示,第一季种植于富源(RS-FY)土壤上的伴矿景天长势最好,其生物量较石林(PS-SL)和罗平(PS-LP)土壤上种植的伴矿景天分别高42.0%、86.0%(图 1);第二季和第三季伴矿景天生物量相较于第一季均显著降低,除生长季节差异外,还可能与镉锌有效性下降不利于超积累植物生长等因素有关。
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注:图中不同小写字母表示同一土壤上不同修复季间差异显著(P < 0.05)。 Note: Different lowercase letters indicate significant differences in different phytoextraction seasons in the same soil(P < 0.05). The same as below. 图 1 供试云南镉地质高背景土壤上伴矿景天生物量 Fig. 1 The dry biomass of Sedum plumbizincicola grown in the tested soils with a high Cd geological background from Yunnan Province |
修复第二季时,种植于PS-LP土壤上的伴矿景天地上部Cd、Zn浓度均显著高于石林和富源,分别为PS-SL和RS-FY土壤的1.9倍、1.2倍(图 2);修复第三季时,三地土壤上伴矿景天地上部Cd浓度无明显差异。RS-FY和PS-LP土壤上第二季种植的伴矿景天地上部Zn浓度较高。综合三季伴矿景天重金属吸取量,计算植物吸取修复效率,以PS-SL和PS-LP土壤上种植的伴矿景天Cd吸收量和修复效率最高,其修复效率分别达82.1%和68.8%。伴矿景天对三地土壤Zn的吸收量较低,3季修复效率仅为5.53%~6.68%。
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图 2 供试云南镉地质高背景土壤上伴矿景天地上部镉(a)和锌(b)浓度 Fig. 2 Shoot Cd(a)and Zn(b)concentrations of Sedum plumbizincicola grown in the tested soils with a high Cd geological background from Yunnan Province |
分析吸取修复前后供试地质高背景土壤Cd、Zn全量变化,发现伴矿景天吸取修复三季后土壤全量Cd、Zn浓度均显著低于修复前土壤,降低率分别为24.8%~58.8%和3.70%~26.3%,以罗平土壤的全量Cd、Zn降幅最大(表 3)。与修复前土壤相比,经吸取修复3季后三地土壤的CaCl2提取态Cd、Zn浓度均显著降低,RS-FY土壤修复3季后CaCl2提取态Cd、Zn浓度高于PS-SL和PS-LP(表 3)。进一步分析BCR法连续提取态土壤Cd、Zn浓度变化(图 3),发现三个地质高背景土壤修复前后Cd均以可还原态和残渣态为主。相较于修复前土壤,修复3季后PS-SL和RS-FY土壤可还原态Cd比例降低、残渣态Cd比例增加,说明可还原态Cd被植物大量吸收;PS-LP土壤则表现为可还原态Cd比例增加、可氧化态Cd比例降低的趋势,说明可能存在可氧化态Cd向可还原态Cd活化并被植物吸收的现象。供试三地土壤吸取修复前后土壤Zn形态均以残渣态为主,占比达78.3%~94.4%。相较于修复前土壤,修复3季后PS-SL土壤Zn形态组成变化不明显;RS-FY土壤弱酸可溶态、可还原态和可氧化态Zn比例降低,残渣态Zn比例增加,说明弱酸可溶态、可还原态和可氧化态Zn被超积累植物吸收;PS-LP土壤则表现为弱酸可溶态、可还原态和可氧化态Zn比例增加、残渣态Zn比例降低的趋势。
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表 3 伴矿景天修复3季对云南镉地质高背景土壤全量及CaCl2提取态镉锌浓度的影响 Table 3 Effect of phytoextraction with three crops on the total and CaCl2-extractable Cd and Zn concentrations of the three soils with a high Cd geological background from Yunnan Province |
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注:F1为弱酸可溶态,F2为可还原态,F3为可氧化态,F4为残渣态;P0为修复前土壤,P3为修复三季后土壤。 Note: F1, acid soluble fraction; F2, reducible fraction; F3, oxidisable fraction; F4, residual fraction. P0, soil before phytoextraction; P3, soil after the third season. 图 3 连续修复3季对云南三地镉地质高背景土壤镉(a)和锌(b)化学形态组成的影响 Fig. 3 Effect of phytoextraction with three crops on Cd(a)and Zn(b)chemical fractions in the three soils with a high Cd geological background from Yunnan Province |
表 4列出了经伴矿景天修复1季后与未经伴矿景天修复的土壤种植水稻的秸秆和糙米生物量。可以看出,经伴矿景天修复1季后的PS-LP和RS-FY土壤上种植水稻秸秆的生物量较未修复处理有所降低,而修复与否对后茬水稻糙米生物量的影响不显著。
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表 4 植物吸取修复对镉地质高背景土壤上水稻生物量的影响 Table 4 Effect of phytoextraction on the biomass of rice cultivated in the soils with a high Cd geological background /(g·pot–1) |
由表 5可知,石林、富源、罗平等三地镉地质高背景土壤经伴矿景天吸取修复1季后种植水稻,其糙米Cd浓度均显著降低,降低幅度分别为58.3%、33.3%和33.3%。经伴矿景天吸取修复1季后,水稻糙米Cd浓度均远低于《食品安全国家标准食品中污染物限量》(GB 2762-2022)规定的水稻糙米Cd浓度0.2 mg·kg–1限量;植物吸取修复对后茬水稻糙米Zn浓度影响与Cd相比不明显,仅修复1季后RS-FY土壤种植的水稻糙米Zn浓度较未修复处理显著降低。
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表 5 植物吸取修复对镉地质高背景土壤上水稻糙米和秸秆镉、锌浓度的影响 Table 5 Effect of phytoextraction on Cd and Zn concentrations in brown rice and rice straw in the soils with a high Cd geological background/(mg·kg–1) |
采用云南富源玄武岩风化物发育的镉地质高背景土壤,开展不同水分管理措施(淹水、干湿交替、旱作)对水稻生长和Cd、Zn吸收影响试验。图 4结果显示,不同水分管理措施对水稻糙米和秸秆生物量的影响不显著。对水稻秸秆和糙米Cd、Zn浓度进行比较后发现,淹水处理下水稻糙米Cd、秸秆Cd浓度显著低于旱作处理。与Cd变化趋势相似,淹水处理下水稻秸秆和糙米Zn浓度显著低于旱作处理(图 5)。
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注:图中不同水分处理下水稻糙米/秸秆生物量均无显著差异(P > 0.05)。 Note: There were no significant differences in the biomass of brown rice or rice straw under different water treatments(P > 0.05). 图 4 不同水分处理对水稻糙米和秸秆生物量的影响 Fig. 4 Effect of different water treatments on biomass of brown rice and rice straw |
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注:不同小写字母表示相同部位不同水分处理下水稻Cd/Zn浓度差异显著(P < 0.05)。 Note: Different lowercase letters indicate significant differences for Cd/Zn concentrations of rice in the same organ under different water treatments(P < 0.05). 图 5 不同水分管理措施对水稻糙米和秸秆镉(a)、锌(b)浓度的影响 Fig. 5 Effect of different water managements on Cd(a)and Zn(b)concentrations of brown rice and rice straw |
由图 1和图 2结果可知,镉地质高背景土壤上伴矿景天长势较好,但其生物量与文献[17-18]报道的相同盆栽土壤用量情形下相比略低,可能与供试土壤肥力相对较低以及地质高背景土壤镉锌有效性较低有关。据报道,Cd与超积累植物的碳酸酐酶活性显著正相关[19],Zn是植物必需元素。因此,一定浓度范围内,土壤镉锌浓度的增加会促进植物的生长。然而,本研究供试三地土壤Cd全量小于1 mg·kg–1,而Zn全量约为250 mg·kg–1,且有效性较人为重金属污染土壤低,不利于镉锌超积累植物的生长和对重金属的吸收。三地土壤中,第一季种植于富源土壤上的伴矿景天长势最好,可能与该土壤的肥力相对最高有关(表 1);第二季和第三季伴矿景天生物量相较于第一季均有显著降低,除生长季节差异外,连续修复过程中土壤镉锌有效性下降,也将不利于超积累植物生长。
通常,超积累植物对土壤有效态重金属的快速吸收将导致第二季超积累植物体内重金属浓度显著降低[17-18]。本研究中,Cd地质高背景土壤上超积累植物吸取修复第二季,其地上部Cd浓度高于第一季;第三季则大幅降低,且低于第一季和第二季(图 2a)。由此可见,三季的整体变化趋势与前期研究结果[20]相一致。伴矿景天第二季地上部Cd浓度增加可能主要与植物生长的“稀释效应”有关,第一季由于土壤养分供应相对充足,伴矿景天生长更好,地上部Cd浓度较低;第二季由于连续修复过程中土壤养分和镉锌有效性下降,伴矿景天生长变差,地上部Cd浓度较高。伴矿景天第三季地上部Cd浓度显著降低,一是与土壤有效Cd的耗竭有关,二是留茬后伴矿景天地上部Cd、Zn浓度一般低于再次扦插的植物[21]。对于Zn吸收而言,伴矿景天地上部Zn浓度总体上表现为第二季和第三季均高于第一季,以第二季最高(图 2b)。其中,罗平土壤(PS-LP)上生长的伴矿景天第三季地上部Zn浓度较第一季增幅更大,主要与土壤残渣态Zn的活化吸收有关(图 3)。供试三地土壤经伴矿景天吸取修复三季后,土壤Cd、Zn全量和有效性均大幅下降,为后茬农作物的安全生产提供了可能性。供试三地土壤中,罗平土壤上种植的伴矿景天三季Cd、Zn吸取修复效率最高,修复后土壤Cd、Zn降低率最高,且Cd有效性最低(表 3),可能与伴矿景天连续种植过程中对土壤Cd的活化吸收作用(图 3)有关。罗平土壤(PS-LP)pH呈中性,高于石林和富源,伴矿景天对其酸化作用更为明显[22-23]。供试三种土壤上植物生长和重金属积累的差异,可能还与土壤母质有关,罗平土壤为石灰岩发育土壤,K、Ca、Mg含量丰富;富源土壤由玄武岩发育而来,长期风化过程中,盐基离子易损失,且质地较黏,不利于植物生长。由表 1数据可知,罗平土壤速效钾含量最高,这一定程度上反映了土壤母质的差异。土壤钾养分的充足供应可促进伴矿景天生长和镉锌向地上部的转运和积累[24]。此外,三地土壤伴矿景天重金属积累的差异还可能受耕作利用后土壤养分与重金属有效性等的综合影响[25-26]。
3.2 镉地质高背景土壤上农作物安全生产碳酸盐岩发育的地质高背景土壤通常呈现出“Cd总量高、有效性低”的特点,作物Cd超标风险普遍较低[9,15]。例如,代子雯等[27]利用广西云表碳酸盐岩母质高背景土壤(全量Cd 2.66 mg·kg–1)开展水稻盆栽试验,发现糙米Cd均未超过国家限值(GB 2762-2017)。唐豆豆等[14]对浙江北部丘陵地区和广西中部岩溶地区碳酸盐岩高背景土壤和水稻重金属含量进行采样调查,发现两地地质高背景土壤上水稻糙米Cd超标风险较低,明显低于人为污染农田土壤。本研究中,罗平、石林、富源等三地Cd地质高背景土壤上生长的水稻,糙米Cd浓度为0.09~0.12 mg·kg–1(表 5),不存在超标现象(参照GB 2762-2022),一定程度上说明了供试高背景土壤Cd生物有效性不高的现象。经伴矿景天吸取修复一季后,石林、富源和罗平三地土壤上种植的水稻糙米Cd浓度均明显降低,降幅分别达58.3%、33.3%和33.3%(表 5)。伴矿景天吸取修复显著降低了土壤Cd全量和生物有效性(表 3),因而后茬水稻重金属吸收明显降低,为后茬作物的安全生产提供了保障。本研究中,考虑到伴矿景天残茬会增加土壤重金属有效性从而使下一季作物地上部积累增加的问题,经伴矿景天吸取修复一季后,第二年夏季种植水稻,此时伴矿景天根系残茬已基本腐解,释放的Cd也已被土壤固相吸附固定,水稻重金属吸收主要与土壤总量和固相的释放有关,更接近于常规水稻种植的结果[18]。水稻收获后连续种植两季伴矿景天,目的是进一步探究Cd超积累植物是否能够大幅降低地质高背景土壤Cd总量和有效性,以期实现高背景、农产品超标土壤的“长久安全利用”。相似的,程晨等[28]关于人为源重金属污染土壤修复的研究也发现,经超积累植物吸取修复两季后,水稻籽粒Cd浓度下降了70.0%~75.6%。本研究中Cd地质高背景土壤上伴矿景天的吸取修复作用与人为污染土壤上的修复效应相似[29],只是Cd去除效率略低[28,30],这与地质高背景土壤重金属有效性较低的特性相吻合。
3.3 水分管理对地质高背景土壤上水稻镉吸收与安全生产的影响大量研究证明,重金属污染土壤上种植水稻结合淹水等农艺调控措施,可有效降低稻田土壤Cd有效性和糙米Cd浓度[31-32]。本研究利用富源玄武岩风化物发育的镉地质高背景土壤,探讨不同水分管理措施(淹水、干湿交替、旱作)对水稻Cd吸收的影响,也获得了一致结论(图 5)。这主要是因为,淹水条件下土壤pH趋于中性,土壤重金属有效性较低[33-34];其次,长期淹水使土壤氧化–还原电位(Eh)迅速下降,硫酸盐在厌氧条件下被还原为S2−,与土壤中Cd等重金属形成沉淀,显著降低其有效性[34-35]。
云南部分地区水稻灌溉主要依靠自然降雨,水稻生长期内稻田水分变化大;部分地方因不具备灌溉条件而选择种植旱稻[36]。本研究发现,旱作处理条件下糙米Cd浓度较淹水处理高达10倍(图 5),说明旱作条件下云南镉地质高背景土壤上生长的水稻仍有较大的糙米Cd超标隐患,需采取相应的修复措施降低Cd全量及有效态浓度,确保Cd地质高背景地区土壤Cd的作物有效性足够低,才能实现水稻长期安全生产。因此,依据地质高背景土壤污染特征,有效结合超积累植物吸取修复技术和农艺调控措施,对于地质高背景土壤的“长久、安全利用”十分必要。
4 结论云南石林、富源、罗平等地Cd地质高背景土壤经伴矿景天吸取修复三季后,土壤全量和有效Cd浓度均大幅下降;伴矿景天吸取修复一季使后茬水稻糙米Cd显著下降,利于实现安全生产;淹水管理下水稻糙米和秸秆Cd浓度大幅度降低,旱作条件下稻米仍有一定的超标风险,植物吸取修复可有效降低地质高背景土壤Cd全量和有效性,利于稻米Cd吸收量的降低,保障农产品安全生产。
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